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diagnocine MCDB 153 Medium

產(chǎn)品簡介

diagnocine MCDB 153 Medium :MCDB 培養(yǎng)基是為培養(yǎng)特定細(xì)胞類型而開發(fā)的,無需血清補(bǔ)充劑。

更新時間:2024-03-20
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diagnocine  MCDB 153 Medium

MCDB 153 培養(yǎng)基
,含微量元素、L-谷氨酰胺和 28mM HEPES 緩沖液,
不含碳酸氫鈉

粉末

產(chǎn)品代碼:HM-AT135


產(chǎn)品描述:


MCDB 培養(yǎng)基是為培養(yǎng)特定細(xì)胞類型而開發(fā)的,無需血清補(bǔ)充劑。每種 MCDB 培養(yǎng)基都針對特定的細(xì)胞類型進(jìn)行配制。MCDB 105 和 110 被配制用于人類二倍體細(xì)胞的快速克隆生長正常。MCDB 131 培養(yǎng)基很初是為人類微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (HMVEC) 的克隆生長而開發(fā)的。MCDB 151、201 和 302 很初是為人類角質(zhì)形成細(xì)胞、雞胚成纖維細(xì)胞和 CHO 細(xì)胞的克隆生長而開發(fā)的。

AT135 是含有微量元素、L-谷氨酰胺和 28mM HEPES 緩沖液的 MCDB 153。HEPES 是一種兩性離子緩沖液,在 37oC 時的 pKa 為 7.3,可防止在培養(yǎng)開始時傾向于發(fā)生的初始 pH 升高,并增加培養(yǎng)基的緩沖能力。建議用戶查閱文獻(xiàn)以獲取有關(guān)針對不同細(xì)胞系特定的培養(yǎng)基補(bǔ)充和生理生長要求的建議。

方向:

  1. 將 17.7gms 懸浮在 900ml 組織培養(yǎng)的水中,持續(xù)溫和攪拌直至粉末*溶解。不要加熱水。

  2. 在 1 升培養(yǎng)基中加入 1.176 克碳酸氫鈉粉末 (TC230) 或 15.7 毫升 7.5% 碳酸氫鈉溶液 (TCL013),攪拌至溶解。

  3. 使用 1N HCl 或 1N NaOH 將 pH 值調(diào)整到低于所需 pH 值的 0.2 - 0.3 pH 單位,因?yàn)樵谶^濾過程中 pH 值會升高。

  4. 用組織培養(yǎng)的水定容至1000ml。

  5. 通過孔隙率為 0.22 微米或更小的無菌膜過濾器過濾,立即對培養(yǎng)基進(jìn)行消毒,使用正壓而不是真空,以盡量減少二氧化碳的損失。

  6. 根據(jù)需要在無菌條件下添加無菌補(bǔ)充劑,并將所需數(shù)量的無菌培養(yǎng)基分配到無菌容器中。

  7. 將液體培養(yǎng)基儲存在 2-8°C 和避光處直至使用。


需要但未提供的材料:

  • 組織培養(yǎng)的水(TCL010)

  • 碳酸氫鈉粉(TC230)

  • 碳酸氫鈉溶液,7.5% (TCL013)

  • 1N 鹽酸 (TCL003)

  • 1N 氫氧化鈉 (TCL002)

  • 胎牛血清 (RM1112/RM10432)


質(zhì)量控制:

  • 外觀:灰白色至乳白色均勻粉末。

  • 溶解度:14.9 gms/L 的澄清溶液。

  • 不含碳酸氫鈉的 pH 值:5.10 - 5.70

  • 碳酸氫鈉的 pH 值:6.40 - 7.00

  • 不含碳酸氫鈉的滲透壓: 300.00 - 340.00

  • 碳酸氫鈉滲透壓:320.00 - 360.00

  • 培養(yǎng)反應(yīng):通過分析細(xì)胞的形態(tài)來定性評估培養(yǎng)基的生長促進(jìn)能力,并通過估計細(xì)胞計數(shù)并通過至少三個傳代培養(yǎng)將其與對照培養(yǎng)基進(jìn)行比較來定量評估培養(yǎng)基的生長促進(jìn)能力。

  • 內(nèi)毒素含量:NMT 5EU/ml


儲存和保質(zhì)期:

  1. 所有粉狀培養(yǎng)基和制備好的液體培養(yǎng)基應(yīng)儲存在 2-8°C。在有效期內(nèi)使用。盡管有上述推薦的儲存條件,某些粉末介質(zhì)在某些情況下可能會出現(xiàn)一些變質(zhì)/降解的跡象。這可以通過顏色變化、外觀變化和顆粒物質(zhì)的存在以及溶解后的混濁度來表示。

  2. 不推薦制備濃縮培養(yǎng)基,因?yàn)橛坞x堿氨基酸和溶解度低的鹽復(fù)合物可能在濃縮培養(yǎng)基中沉淀。

  3. 制備培養(yǎng)基的 pH 值和碳酸氫鈉濃度是影響細(xì)胞生長的關(guān)鍵因素。這也受所用培養(yǎng)基量和培養(yǎng)容器體積(表面積與體積比)的影響。例如,在大瓶中,如 Roux 瓶,隨著大量二氧化碳的釋放,pH 值會明顯升高。因此,必須為每種細(xì)胞類型確定 pH、碳酸氫鈉濃度、表面積與體積比的很佳條件。我們建議嚴(yán)格監(jiān)測 pH 值。如果需要,可以使用無菌 1N HCl 或 1N NaOH 或通過在二氧化碳中鼓泡來調(diào)節(jié) pH 值。

  4. 如果需要,可以在過濾滅菌之前或之后將補(bǔ)充劑添加到培養(yǎng)基中,并遵守?zé)o菌預(yù)防措施。培養(yǎng)基的保質(zhì)期取決于添加到培養(yǎng)基中的補(bǔ)充劑的性質(zhì)。

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