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當前位置:首頁新聞中心單克隆抗體與同聚體抗原的雙價結(jié)合增加親合性

單克隆抗體與同聚體抗原的雙價結(jié)合增加親合性

更新時間:2012-02-10點擊次數(shù):3827

親合性(avidity)是測定抗體和抗原復合物的整體穩(wěn)定性。抗體—抗原相互作用的整體強度受3個主要因素控制:抗體對表位的內(nèi)在親和力、抗體和抗原的結(jié)合價以及參與反應成分的立體結(jié)構(gòu)。因為親合性是指整個反應,故可從根本上決定所用免疫化學技術(shù)的成敗。

 
    當抗體和抗原形成多價復合物時相互作用的強度顯著增加
    大多數(shù)免疫化學步驟包括多價相互作用。所有抗體都是多價的;IgG和大多數(shù)IgA為2價,IgM為10價??乖梢允嵌鄡r的,因其含有相同表位的多個拷貝,例如:各種同聚物,或者因為存在可被不同抗體識別的眾多表位。多價相互作用可以顯著地穩(wěn)定免疫復合物,致使反應實際上是不可逆的。
    多聚性相互作用甚至可以使低親和力抗體牢固地結(jié)合。由于一些方法很可能是多價的相互作用,所以低親和力抗體在一種方法中可能性能良好,但不適用于另一種方法。當抗體在不同方法中顯示這種差別時,經(jīng)常是由于在多價結(jié)合中的差異造成的。同樣地,在一種方法中不可測的交叉反應可能干擾其他方法分析的結(jié)果。
    預測多價的影響通常并不容易,因為反應包括分子的幾何狀排列產(chǎn)生的空間壓縮。然而,多價的影響通過下述的幾個簡單例子來說明:①單克隆抗體與同聚體抗原的相互作用;②多克隆抗體與有多個表位的抗原結(jié)合產(chǎn)生大量多聚性復合物;③多克隆抗體與有多個表位的抗原結(jié)合形成第二抗體與多聚性結(jié)合的靶位;④抗體和固定在固相載體上的抗原結(jié)合。這些模式雖在某些方面有差別,但是具有上述例子的基本特征。
單克隆抗體與同聚體抗原的雙價結(jié)合增加親合性
 
    同聚體的抗原存在相同的重復表位,促進雙價結(jié)合
    當單克隆抗體和多聚性抗原結(jié)合時,開始的反應是與前面討論的雙分子相互作用相同,抗體通過擴散遇到抗原。然而,反應的第二步是抗體的游離結(jié)合位點和保留相同抗原分子上的同樣位點相結(jié)合。這個反應是發(fā)生在分子內(nèi)的轉(zhuǎn)換并不依靠擴散作用。它僅受到構(gòu)象的限制。這種分子復合物一旦構(gòu)成,單一的抗體—表位相互作用的解離率與一般雙分子復合物相似。然而,  由于抗原通過另一些相互作用將仍會與之結(jié)合時,觀察到的解離將十分緩慢,因此形成非常穩(wěn)定的抗體—抗原復合物。
    這種類型的多聚性相互作用在所有免疫化學中都可能發(fā)生。
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