純化的抗體可通過不同的途徑獲取,就本書中描述的大多數(shù)情況而言,這些抗體可通過下述方法制備或從商家購買。從商家購買的抗體,通常附有正確的儲存方法。
1.經(jīng)純化制備的抗體在常用的緩沖液中是穩(wěn)定的。其DH應(yīng)保持在中性左右。如果pH在7-8之間,即使保存多年,對
抗體也無損害。多數(shù)情況下,鹽濃度適于保持在0~150mmol/L之間,但在長期存放的抗體中,鹽溶液濃度高達(dá)500mmol/L時,對抗體可能有損害。如果沒有其他說明.律議用PBS或50mmol/LTris(DH8.0)溶液長期存放抗體。
2.如果沒有特殊原因而避免使用疊氮鈉,亦可加入疊氮鈉,濃度為0.02%。將純化的抗體樣本分裝成合適的體積,于—20℃保存。
3.純化的抗體溶液應(yīng)以較高的濃度(如lmg/m1)在中性pH下保存。:常用的抗體儲存濃度高達(dá)l0mg/ml。較低濃度的抗體凍存前應(yīng)濃縮。所有標(biāo)準(zhǔn)的濃縮方法(如超濾法),皆可使用。還有一個簡單的方法是用蛋白A或蛋白G親和柱來濃縮溶液.如果純化的抗體不是用于標(biāo)記,可將它們以較低濃度儲存于加有1%BSA的溶液中。
4.工作液應(yīng)在4℃下融化并存放,可能穩(wěn)定達(dá)數(shù)月。