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懸浮細(xì)胞用甩片機(jī)黏附于載玻片

更新時間:2012-09-20點(diǎn)擊次數(shù):8630

處理懸浮細(xì)胞的一個簡單辦法是在固定細(xì)胞之前把細(xì)胞黏附在固相支持物上。方法之一是使用甩片機(jī)。細(xì)胞在固定之前,用特殊的離心方法將細(xì)胞甩至載玻片上。需要注意的是離心力可使細(xì)胞壓癟并擴(kuò)張,使抗體更容易結(jié)合細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),但也輕微扭曲了正常的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。

 
    1.所需溶液和儀器
    PBS及甩片機(jī)。
 
    2.操作步驟
    (1)用PBS洗滌細(xì)胞(400r/min2X106/m1;離心5min),并重懸于PBS中。調(diào)整濃度至1~(2)將顯微鏡載玻片固定于甩片機(jī)的轉(zhuǎn)頭上,然后加入0.1—0.5ml細(xì)胞懸液;
    (3)迅速使離心力達(dá)到1200√min,離心5~10rain;
    (4)選擇項(xiàng):使玻片上單層細(xì)胞在空氣中干燥15—20min。
    此時,細(xì)胞可進(jìn)行固定。
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